Sunt revizuite și evaluate teste de laborator pentru diagnosticarea COVID-19 în practică în prezent, conform recomandărilor organismelor internaționale de experți.
COVID-19 boală, care își are originea în Wuhan, China, a afectat până în prezent peste 208 de țări. Comunitatea științifică din întreaga lume a fost pusă cu o provocare semnificativă în ultimele luni, de a se dezvolta teste diagnostice pentru Covid-19 detectarea bolii în scopul screening-ului pacienților și persoanelor suspectate pentru a gestiona și controla eficient pandemia.
Înainte de a evalua metodele și practicile actuale utilizate pentru detectarea COVID-19, să înțelegem mai întâi ce cauzează COVID-19 și cum se dezvoltă teste de diagnosticare pentru a depista pacienții pentru această boală. Boala COVID-19 este cauzată de un ARN cu catenă pozitivă virus care sunt zoonotice, ceea ce înseamnă că pot traversa barierele speciilor de la animale la oameni și pot provoca, la oameni, boli variind de la răceala obișnuită până la boli mai grave, cum ar fi MERS și SARS. Virusul care provoacă COVID-19 a fost acum numit SARS-CoV-2 de către Comitetul Internațional de Taxonomie a Virușilor (ICTV), deoarece este foarte asemănător cu cel care a provocat focarul de SARS (SARS-CoV). Testul de diagnostic pentru boala COVID-19 poate fi dezvoltat în mai multe moduri.
Metoda cea mai populară și adoptată în prezent la nivel mondial este dezvoltarea unui test de diagnosticare care poate detecta virusul SARS-CoV-2 în sine. Acest test se bazează pe detectarea genomului viral în proba pacientului prin RT-PCR în timp real (reverse transcriptase-real time Polymerase Chain Reaction). Aceasta implică conversia ARN-ului viral în ADN folosind o enzimă numită transcriptază inversă și apoi amplificarea ADN-ului folosind un set specific de primeri și o sondă fluorescentă, care se leagă la o regiune specifică a ADN-ului viral, folosind o polimerază Taq și detectând semnalul fluorescent. Aceste teste sunt denumite NAAT (Teste de amplificare a acidului nucleic). Această tehnică poate fi foarte utilă pentru depistarea foarte precoce a prezenței acidului nucleic în proba de pacient, chiar și la pacienții asimptomatici care nu prezintă simptome ale bolii COVID-19 (în special în perioada de incubație de 14-28 de zile) și în partea ulterioară. precum și atunci când boala este în toată regula.
Diverse companii din întreaga lume au lucrat într-o cursă contra cronometru în ultimele luni pentru a dezvolta un test de diagnosticare bazat pe NAAT pentru detectarea SARS-CoV-2 pe baza CDC (Centrul pentru Controlul Bolilor), Atlanta, SUA și ghidurile OMS ( 1, 2). Autoritățile sanitare din întreaga lume au aprobat aceste teste pentru uzul de urgență pentru detectarea SARS-CoV-2. Genele virale vizate până acum includ genele N, E, S și RdRP, împreună cu controale pozitive și negative adecvate. Probele de pacient care urmează să fie recoltate pentru un astfel de test sunt din tractul respirator superior (tampon nazofaringian și orofaringian) și/sau tractul respirator inferior (sputa și/sau aspirat endotraheal sau lavaj bronhoalveolar). Cu toate acestea, este posibil și detectarea virusului în alte probe, inclusiv în scaun și sânge. Eșantioanele trebuie colectate rapid, într-o manieră adecvată, luând toate măsurile de precauție necesare și respectând practicile de biosecuritate (conform liniilor directoare stabilite de OMS[1]), de la pacienții care îndeplinesc definiția de caz suspectat pentru COVID-19, păstrându-l și ambalând-o. bine dacă trebuie să fie transportat la centrul de diagnostic și apoi procesat (extragerea ARN-ului într-un cabinet de biosecuritate într-o unitate BSL-2 sau echivalentă) rapid, într-un mod care să asigure integritatea probei. Toate acestea trebuie efectuate în mod prioritar pentru un management clinic mai bun și un control al focarelor.
Timpul de detectare a diferitelor teste disponibile pe bază de NAAT dezvoltate de marile companii de diagnosticare din întreaga lume variază de la 45 de minute la 3.5 ore. Aceste teste sunt aduse diverse îmbunătățiri pentru a le converti în teste la punctul de îngrijire și pentru a obține rezultatele dorite în cât mai puțin timp posibil, fără a compromite acuratețea rezultatului, pentru a crește numărul de teste care pot fi făcute într-o zi.
Alte opțiuni de testare de diagnosticare sunt teste de diagnostic rapid (RDT) care fie detectează antigenele/proteinele virale care sunt exprimate pe suprafața particulelor de virus SARS-CoV-2 pe măsură ce se reproduc în celulele gazdă și provoacă boală sau anticorpi gazdă ca răspuns la infecție; acest test detectează prezența anticorpilor în sângele persoanelor despre care se crede că au fost infectate cu COVID-19 (3).
Precizia și reproductibilitatea RDT pentru detectarea antigenelor virale depind de mai mulți factori, inclusiv timpul de la debutul bolii, concentrația de virus în probă, calitatea și procesarea probei și formularea reactivilor prezenți în kiturile de testare. Datorită acestor variabile, sensibilitatea acestor teste poate varia de la 34% la 80%. Un dezavantaj major al acestei opțiuni este că virusul trebuie să fie în stadiul său de replicare și infecție pentru a detecta proteinele virale.
În mod similar, testele de detectare a anticorpilor gazdei se bazează pe puterea răspunsului anticorpilor, care depinde de factori precum vârsta, starea nutrițională, severitatea bolii și anumite medicamente sau infecții care suprimă sistemul imunitar. Un dezavantaj major al acestei opțiuni este că anticorpii sunt produși în câteva zile până la săptămâni după infectarea cu virusul SARS-CoV-2 și trebuie să așteptați atât de mult pentru a efectua testul. Aceasta înseamnă că un diagnostic al infecției cu COVID-19 bazat pe răspunsul anticorpilor gazdei va fi adesea posibil doar în faza de recuperare, când multe dintre oportunitățile de intervenție clinică sau prevenirea transmiterii bolii au trecut deja.
În prezent, RDT-urile menționate mai sus au fost aprobate doar într-un cadru de cercetare și nu pentru diagnostic clinic din cauza lipsei de date (3, 4). Pe măsură ce din ce în ce mai multe date epidemiologice devin disponibile pentru COVID-19, mai multe RDT-uri vor fi dezvoltate și aprobate ca teste la punctul de îngrijire într-un cadru clinic, deoarece pot da rezultate în 10-30 de minute, spre deosebire de testele bazate pe NAAT, care durează în medie. câteva ore pentru depistarea bolii.
***
Referinte:
1. OMS, 2020. Recomandări privind strategia de testare în laborator pentru COVID-19. Îndrumări intermediare. 21 martie 2020. Disponibil online la https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf Accesat pe 09 aprilie 2020
2. CDC 2020. Informații pentru laboratoare. Ghid interimar pentru laboratoare Disponibil online la https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html Accesat pe 09 aprilie 2020.
3. OMS, 2020. Sfaturi privind utilizarea testelor la punctul de îngrijire. Rezumat științific. 08 aprilie 2020. Disponibil online la https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 Accesat pe 09 aprilie 2020.
4. ECDC, 2020. O prezentare generală a situației de testare rapidă pentru diagnosticarea COVID-19 în UE/SEE. 01 aprilie 2020. Centrul european pentru prevenirea și controlul bolilor. Disponibil online la https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea Accesat pe 09 aprilie 2020
***
